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致畸试验

[拼音]:zhiji shiyan

[外文]:teratogenesis test

用动物检测某种环境污染物(即受试物)对人类是否会引起畸变的一种实验方法。一般要求实验动物对受试物的代谢方式和胎盘解剖学结构与人类相近,而且一胎多仔、妊娠期较短、便于饲养和费用较低。目前多用大鼠、小鼠或家兔,如有条件也可采用狗或猴。对各种动物进行致畸试验的基本方法相同。最常用的是大鼠试验法。

试验步骤

选择一批发育良好的初成年雄鼠和雌鼠,按比例同笼繁殖。当雌鼠 口有阴栓或在 粘液中检出 时,便可确定雌鼠受孕的确切日期。然后将受孕雌鼠,以每组10~20只分成各试验组,同时另设对照组。

给各实验动物的受试物,一般以亚急性试验中的较大无作用剂量为高剂量,以高剂量的1/30为低剂量。由于致畸物质在胚胎发育中的组织分化和器官形成期最能显现致畸作用,故给予受试物的时间必须恰当,一般应选择在组织分化和各器官形成期之间。过早将影响受精细胞的着床;过迟则大部分器官已经形成,不能显现致畸作用。常用受试动物的着床期、组织分化和大部分器官形成期见表,表内时间从受孕之日起算。

畸形检查

主要检查外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形三个方面:

(1)外观畸形。将胎仔从 取出,逐个称重、测定身长和尾长,评价其发育情况。然后仔细检查是否出现畸形,包括头面部和脑、眼、鼻、耳、颌、唇的畸形,四肢和趾的畸形,躯干和尾部的畸形等(见图)。

(2)内脏畸形。将检查过外观的同一窝胎鼠的2/3置于鲍音(Bouin)液中,使组织固定,以检查内脏畸形;其余1/3经茜素红染色后检查骨骼畸形。将在鲍音液中固定的胎仔标本,用刀片进行各种切面检查,并与对照组进行比较,分别检查腭和舌部畸形,眼、鼻和脑部畸形,胸腹部内脏器官的位置、大小和形状异常等。

(3)骨骼畸形。把经过乙醇固定的胎仔,除去内脏(或同时剥去皮肤),转浸入1%的氢氧化钾溶液中,使肌肉和软组织完全透明,骨骼清晰可见。再用茜素红溶液将骨骼染成红玫瑰色。然后用放大镜或解剖显微镜依次观察头颅骨、椎骨、肋骨、尾骨和肢骨,记录有无缺损、增减、溶合、骨化迟缓等异常。

受试物致畸性的评定

确定受试物是否有致畸作用,一般是根据各组动物在试验中出现畸胎的数目和活产胎仔总数所计算的畸胎发生率;也可根据各组动物活产胎仔中出现畸形的频数(如一胎仔出现三种畸形,即记录为三次畸形)所计算的畸形总数,或根据出现畸胎孕鼠数在活产孕鼠总数中所占的百分率。有时受试动物胎仔的畸形,是以某种或某几种畸形为主,则应分别计算某种畸形的出现率;然后将各组动物的畸胎发生率、畸形总数和孕鼠出现畸胎率,进行统计处理,并与对照组进行比较;然后参考着床数、活胎数、死胎数、吸收胚胎数以及活产胎仔平均体重、身长和尾长等指标进行综合评定。环境污染物的致畸作用,除与环境污染物本身特性有关外,还与受试动物的选择、给予受试物的时间、剂量和方式等有关。因此,有时应重复试验,或对两种不同品系的动物同时进行试验,才能得出正确结论。

致畸作用具有较显著的种属差异,对动物有致畸作用的物质,不一定对人类有致畸作用。但致畸作用毕竟是化学物质毒性的一种表现,因此,凡对动物有致畸作用的物质,一般应尽量使其不与人特别是孕妇接触。

参考书目

上海第一医学院、我国医学科学院卫生研究所等:《食品毒理学》,人民卫生出版社,北京,1977。

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