秦始皇死后，他与赵高合谋，伪造遗诏，迫令始皇长子扶苏自裁，立少子胡亥为二世皇帝。
秦二世胡亥为了修好阿房宫，征发徭役，把人民推向苦难的深渊，当时我国人民的反秦起义已经风起云涌。为了统治阶级的共同利益，李斯同右丞相去疾、将军冯劫劝秦二世胡亥停建阿房宫，减少一些徭役。
当时，秦二世正与宫女宴饮作乐，见李斯等人上书十分恼怒，下令将他们逮捕入狱，李斯在狱中多次上书，都被赵高扣留。赵高借机说李斯与其儿子李由谋反，对李斯严刑拷打，刑讯逼供，李斯被迫承认谋反，在秦二世二年(前208年)七月被杀死，夷三族。
李斯先被脸上刺字，再割去鼻子截下趾，然后斩杀，之后从断，其全家、亲属均被一并处斩。
早在李斯去秦国之前，他就曾对老师荀子说过：“故诟(耻辱)莫大于卑贱，而悲莫甚于穷困。”这是其人生观的表露。
后来司马迁在《史记·李斯列传》中曾痛斥道：“持爵禄之重，阿顺苟合，严威酷刑，听高邪说，废谪立庶。”点出了他以上结局的根本原因。
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李斯德氏菌属
李斯(?～前208)
李斯(?～公元前208)
李斯特，F.
李斯特，G.F.
李斯·戴维斯，T.W.
李斯特，F.von