[拼音]：fangshexing biaoji fangfa

[外文]：radiolabelling method

用易于检测的一种或两种放射性核素给某种化合物分子打上“记号”的方法。作“记号”的放射性核素，如果是该化合物分子中固有元素的同位素，一般称为同位素标记，否则称为非同位素标记。标记后的化合物，除了具有特定的放射性并具有足够的比活度（见活度）和放化纯度外，其化学和生物学性质与无标记的相应化合物相同，或在实用意义上非常近似。

根据放射性原子在分子中的分布情况，可分为以下五种：

（1）特殊标记，放射性原子明确无误地分布在分子中已知的特定位置上；

（2）均匀标记，放射性原子以统计均匀的形式分布在整个分子中；

（3）一般标记，放射性原子以一种不确定的形式分布在分子中；

（4）标称标记，放射性原子被标记的位置未经实验证实；

（5）双标记，在标记分子中出现两种不同的放射性原子或在分子中两个不同的位置上出现同种放射性原子，或将单独标记的两种分子加以混合。

20世纪初，特别从40年代起，人们一直在探索各种标记方法，如化学合成法、生物化学法、同位素交换法、辐射合成法、热原子反冲标记法等，但常用的方法有：化学合成法、生物化学法、同位素交换法（见表）。

标记方法的选择和分离、分析、储存方法的确定，取决于以下因素：

（1）所用核素的种类和它的起始原料、中间体的化学形式；

（2）标记类型对产物的比活度、放化纯度的要求；

（3）操作过程中核衰变、自辐解、生物活性的保持，以及安全防护等。

是制备氚、碳14、磷 32、硫 35、碘 125等核素标记化合物的有效的方法，主要特点是应用传统的化学合成路线，在 2～10毫摩尔微量操作条件下，采用最简短的放射性操作程序来完成标记的化学反应。常用的起始原料有：3HHO、 3H2、NaBH33H、Ba14CO3、14CO2、32PCl3、32P2S5、32P2O5、32PH3、35SO2、H335SO4、H335S和Na125I。几种常用的化学合成反应如下：

化学合成法的优点是能控制标记原子在被标记分子中的位置（氚有例外）和产品的纯度、比活度等，但它不能得到纯的光学异构体形式，故对生物大分子的标记显得无能为力。

基于单细胞生物(如藻类)和植物（如离体叶片），以及粗制酶或纯酶的应用，近年来已成为制备高比活度、高产额并能保持其天然构型的标记化合物的重要方法。主要用于碳14的标记，其次是磷32、硫35的标记。例如，将植物叶片置于14CO2气氛中培养，通过光合作用可以生成碳14均匀标记的氨基酸、核苷酸和糖类等多种化合物。

碳14生物化学法标记，一般可同时得到具有较高比活度的多种均匀标记的化合物，并能保持其生物活性。缺点是不能用来制备其他标记类型的标记化合物。在磷32或硫35生物化学法标记中，由于酶反应的专一性，标记反应可在极微量条件下进行，常用来制备具有较高比活度并保持生物活性的特殊标记类型的化合物。

同位素交换反应可用下式表示：

该法特别有利于氚标记，80年代初国际市场上许多品种的氚标记化合物是采用此法制得的。该法也有利于碘125、硫35的标记。同位素交换法操作简便，适宜于对天然化合物或结构复杂的药物的标记，其缺点是放射性核素的利用率低，标记位置常常不可预知，比活度低，产品纯化困难等。随着微波放电法和低压氚化粒子束等方法的应用和改进，该法可望有新的进展。

标记化合物的纯化、分析及其稳定性的研究是标记方法本身的延续。评价任何一种标记程序（方法）的好坏，最重要的指标是是否具有能分离出高放化纯度和化学纯度产物的能力。色谱法，如柱色谱、薄板色谱、纸色谱以及高效液相色谱等，是一类常用的分离纯化标记化合物的方法。但它们对于结构类似的化合物的分离有时也会遇到困难，因此产物纯度的确证仍需要直接的实验测试。标记化合物纯度的分析，指放化纯度、化学纯度（两者通常都要求达到95％以上）的分析和标记的位置、生物活性等的测定。所用的方法中，除了一般常规的熔点、沸点、折光、旋光、紫外、红外、核磁、气-液色谱外，目前对于非挥发性样品的检定，最重要的是各种放射性色谱技术和反相同位素稀释法，而对于挥发性样品的检定，则采用放射性气相色谱法及高效液相色谱法。较佳的方法为高效液相色谱法与反同位素稀释法的匹配使用。对于放射性强度的测定和标记位置的确定，通常采用放射性液体闪烁谱仪和核磁共振谱仪等手段。

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